在本季中，Tim Speedle離開了，而新人Ryan Wolfe則加入了小組。
　　Horatio Caine：David Caruso飾演，是邁阿密達德郡犯罪實驗室的組長，曾經是拆彈小組的警官，現在是監識分析師。
　　Calleigh Duquesne：Emily Procter演，彈道科學家，出生于路易西安那州達尼爾（Darnell），西班牙語十分流利，曾在圖蘭大學（Tulane University）獲得物理學學士學位。
　　Eric Delko：Adam Rodriguez飾演，指紋與藥品辨識專家，土生土長于邁阿密，曾在邁阿密大學獲得化學學士學位。父親俄羅斯人，母親古巴人，所以西班牙語和俄語都很流利。當情況需要時，達可在小組里通常是扮演蛙人的角色。
　　Alexx Woods：Khandi Alexander飾演，邁阿密達德郡的驗尸官。她有一個古怪的習慣就是在驗尸的時候跟尸體講話，通常是想要讓死者死后可以更為安詳。
　　Ryan Wolfe：Jonathan Togo飾演，是一個想進入真實鑑識工作的基層巡邏員警。他了解到自己永遠無法取代史畢的地位，只能盡力地成為小組的一員。沃夫首次出現在“Under the Influence”這一集，不過直到“Hell Night”這一集之后才變成常態演出。
　　Yelena Salas：Sofia Milos飾演，一個常常跟CSI一起調查的重案組探員，也是何瑞修弟弟雷蒙的遺孀。